导读 大家好,乐天来为大家解答以下的问题,关于western blot的原理及流程,western blot的原理这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1
大家好,乐天来为大家解答以下的问题,关于western blot的原理及流程,western blot的原理这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、其实原理很简单,你要坚持某种蛋白在样品中是否含有或者大致的量,你就可以先购买或制备该蛋白的抗体,之后通过电泳实验,将蛋白样品简单分离,可以是按分子量分离也可以是按等电点分离,或者进行双向电泳,一般使用SDS-PAGE。
2、之后进行转膜,将蛋白从胶上转移到膜上,以利于抗体杂交,之后加入抗体进行孵育杂交,之后洗掉没有结合的抗体,就可以进行显色反应了,显色反应很多,有化学发光、荧光等等。
3、其实说白了就是让你能检测到你加入的抗体都在哪里。
4、之后你就可以确认你的样品里有没有该蛋白,相对的量是多少。
5、要是想要确定绝对的量就要使用ELISA 了。
本文分享完毕,希望对大家有所帮助。
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